Мултиплексни комплет за ПЦР у реалном времену за нови коронавирус (САРС-ЦоВ-2).
Овај високо осетљив ПЦР комплет спреман за употребу доступан је у лиофилизованом формату (процес сушења замрзавањем) за дуготрајно складиштење.Комплет се може транспортовати и чувати на собној температури и стабилан је годину дана.Свака епрувета са премиксом садржи све реагенсе потребне за ПЦР амплификацију, укључујући реверзну транскриптазу, Так полимеразу, прајмере, сонде и дНТПс супстрате.Потребно је само додати 13ул дестиловане воде и 5ул екстраховане РНК шаблоне, а затим се може покренути и појачати на ПЦР инструментима.
кПЦР машина треба да испуни следеће захтеве:
1. Поставите ПЦР епрувету са 8 трака запремине 0,2 мл
2. Имају више од четири канала за детекцију:
| Канал | ексцитација (нм) | Емисија (нм) | Претходно калибриране боје |
| 1. | 470 | 525 | ФАМ, СИБР Зелени И |
| 2 | 523 | 564 | ВИЦ, ХЕКС, ТЕТ, ЈОЕ |
| 3. | 571 | 621 | РОКС, ТЕКСАС-РЕД |
| 4 | 630 | 670 | ЦИ5 |
ПЦР платформе:
7500 ПЦР систем у реалном времену, Биорад ЦФ96, иЦицлер иК™ ПЦР систем детекције у реалном времену, Стратагене Мк3000П, Мк3005П
Тешкоћа транспорта хладног ланца реагенса за детекцију нуклеинске киселине новог коронавируса
Када се конвенционални реагенси за детекцију нуклеинске киселине транспортују на велике удаљености, потребно је складиштење и транспорт хладног ланца (-20±5) ℃ како би се осигурало да биоактивност ензима у реагенсима остане активна.Да би температура достигла стандардну, потребно је неколико килограма сувог леда за сваку кутију реагенса за тестирање нуклеинске киселине чак и мање од 50 г, али може трајати само два или три дана.Из перспективе индустријске праксе, стварна тежина реагенаса које издају произвођачи је мања од 10% (или далеко мања од ове вредности) контејнера.Већина тежине долази од сувог леда, паковања леда и кутија од пене, тако да су трошкови транспорта изузетно високи.
У марту 2020. ЦОВИД-19 је почео да се шири у иностранству, а потражња за реагенсом за откривање нуклеинске киселине новог корона вируса драматично се повећала.Упркос високим трошковима извоза реагенса у хладном ланцу, већина произвођача га ипак може прихватити због велике количине и високог профита.
Међутим, са унапређењем националних извозних политика за антипандемијске производе, као и унапређењем националне контроле протока људи и логистике, долази до продужења и неизвесности у времену транспорта реагенса, што је резултирало израженим проблемима са производима изазваним превозом.Продужено време транспорта (време транспорта од око пола месеца је врло уобичајено) доводи до честих кварова производа када производ стигне до клијента.Ово је узнемирило већину предузећа за извоз реагенса нуклеинске киселине.
Лиофилизована технологија за ПЦР реагенс помогла је у транспорту реагенса за откривање нуклеинске киселине новог корона вируса широм света
Лиофилизовани ПЦР реагенси се могу транспортовати и чувати на собној температури, што не само да може смањити трошкове транспорта, већ и избећи проблеме са квалитетом узроковане процесом транспорта.Стога је лиофилизација реагенса најбољи начин да се реши проблем извозног транспорта.
Лиофилизација укључује замрзавање раствора у чврсто стање, а затим сублимацију и одвајање водене паре под вакуумом.Осушени раствор остаје у посуди истог састава и активности.У поређењу са конвенционалним течним реагенсима, пунокомпонентни лиофилизовани реагенс за детекцију нуклеинске киселине Новел Цоронавируса који производи Лиминг Био има следеће карактеристике:
Изузетно јака топлотна стабилност:може да стоји на 56℃ током 60 дана, а морфологија и перформансе реагенса остају непромењени.
Чување и транспорт на нормалној температури:нема потребе за хладним ланцем, нема потребе за складиштењем на ниској температури пре отварања, потпуно ослободите простор за хладно складиштење.
Спремни за употребу:лиофилизација свих компоненти, нема потребе за конфигурацијом система, избегавајући губитак компоненти високог вискозитета као што је ензим.
Мултиплекс мете у једној цеви:циљ детекције покрива нови ген ОРФ1аб коронавируса, Н ген, С ген да би се избегла геноваријација вируса.Да би се смањио лажно негативан, хумани РНасе П ген се користи као интерна контрола, како би се задовољила клиничка потреба за контролом квалитета узорка.
